隨著食品安全、傳染病、心血管疾病和腫瘤診斷需求的不斷提升以及“互聯(lián)網(wǎng)+”的快速成長(zhǎng),簡(jiǎn)便快速、小型化、高靈敏度的Point of Care Testing (POCT)受到了公眾的廣泛關(guān)注。盡管POCT行業(yè)和技術(shù)發(fā)展迅速,上世紀(jì)70年代發(fā)展起來(lái)的免疫試紙條仍然是技術(shù)最為成熟,應(yīng)用最為廣泛POCT檢測(cè)產(chǎn)品,在疾病診斷、食品安全、動(dòng)植物疫病、環(huán)境污染等領(lǐng)域有廣泛應(yīng)用。但是目前免疫試紙條普遍存在靈敏度低、檢測(cè)靶標(biāo)單一的問(wèn)題,因此主要用于蛋白分子的檢測(cè),較難滿足核酸快速檢測(cè)的高通量需求。
最近,東南大學(xué)生物電子學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室趙祥偉教授課題組利用表面增強(qiáng)拉曼散射(SERS)編碼納米標(biāo)簽結(jié)合DNA微陣列在一個(gè)試紙條上實(shí)現(xiàn)了11種呼吸道感染(RTI)病原體DNA的快速高靈敏度檢測(cè),相關(guān)研究成果于2019年6月7日在線發(fā)表于《Theranostics》雜志。該研究將亞甲基藍(lán)(MB)和尼爾藍(lán)(NBA)染料分子封裝在銀核金殼間隙制得的兩種SERS編碼納米標(biāo)簽(AgMB@Au和AgNBA@Au)分別與RTI病原體DNA檢測(cè)探針偶聯(lián)用于金標(biāo)墊包被,然后在常用試紙條硝酸纖維素(NC)膜上構(gòu)建2×3的檢測(cè)點(diǎn)微陣列,每個(gè)檢測(cè)點(diǎn)固定2種病原體DNA捕獲探針。反應(yīng)后,通過(guò)采和解碼檢測(cè)點(diǎn)的拉曼信號(hào)即可實(shí)現(xiàn)對(duì)11種RTI病原體DNA的定量檢測(cè),檢測(cè)時(shí)間僅20min。得益于NC膜的多孔結(jié)構(gòu)和SERS納米標(biāo)簽的超高靈敏度,這種方法對(duì)RTI病原體核酸的最低檢測(cè)限(LOD)低于0.041 pM,檢測(cè)的線性范圍分別為1 pM-50 nM,覆蓋了5個(gè)數(shù)量級(jí),有望大大促進(jìn)RTI的快速篩查,提高臨床的診療效率。
市場(chǎng)常用NC試紙條寬度在3mm左右,且為多孔結(jié)構(gòu),高密度微陣列制備難度較大。該方法通過(guò)SERS編碼納米標(biāo)簽實(shí)現(xiàn)了一個(gè)檢測(cè)點(diǎn)上多個(gè)DNA靶標(biāo)序列的同時(shí)檢測(cè),有效降低了微陣列密度,解決了試紙條核酸檢測(cè)的低通量問(wèn)題,從而創(chuàng)新性的結(jié)合了試紙條、DNA微陣列以及SERS編碼納米標(biāo)簽的優(yōu)勢(shì),具有成本低、通量高、速度快等優(yōu)點(diǎn),為試紙條的高通量快速核酸檢測(cè)提供了新的解決方案。
該研究是趙祥偉教授課題組前期研究工作(Biosensorsand Bioelectronics, 2018, 106: 204-211, Sensors& Actuators: B. Chemical, 2018, 277: 502-509)的進(jìn)一步拓展,得到了國(guó)家自然科學(xué)基金和國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃等項(xiàng)目的支持。這種高通量檢測(cè)試紙條為POCT提供了新的思路,在疾病診斷、檢驗(yàn)檢疫和環(huán)境檢測(cè)等領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用前景。
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原文標(biāo)題:東南大學(xué)就快速高通量核酸檢測(cè)試紙條研究取得新進(jìn)展
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