引 言

　　聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase Chain Reaction，PCR)是20世紀(jì)80年代中期發(fā)展起來(lái)的體外核酸擴(kuò)增技術(shù)。該技術(shù)是分子生物學(xué)發(fā)展史上的一個(gè)里程碑，它使得DNA分子可以在生物體外進(jìn)行放大擴(kuò)增。在短短的數(shù)年內(nèi)，這項(xiàng)技術(shù)已廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)的研究中，對(duì)基因克隆、DNA序列分析等現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展起到了重要的作用。我國(guó)目前使用的PCR儀主要依賴(lài)于進(jìn)口，為了在該技術(shù)領(lǐng)域追趕國(guó)際先進(jìn)水平，與海爾集團(tuán)聯(lián)合對(duì)PCR儀進(jìn)行了開(kāi)發(fā)研究。

　　隨著U盤(pán)的普遍使用和USB技術(shù)的嵌入式系統(tǒng)應(yīng)用，方便用戶(hù)進(jìn)行程序修改和程序的存儲(chǔ)，PCR設(shè)計(jì)中采用可以熱插拔的USB接口，即在PCR硬件系統(tǒng)中加入了USB主控芯片，使其能夠?qū)盤(pán)等存儲(chǔ)設(shè)備進(jìn)行讀寫(xiě)操作，從而實(shí)現(xiàn)數(shù)據(jù)的存儲(chǔ)和轉(zhuǎn)移。

　　1 USB系統(tǒng)的硬件設(shè)計(jì)

　　在數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)中，USB的應(yīng)用大體可以采用兩種方案：一是直接采用集成USB設(shè)備接口的嵌入式微控制器；二是采用單獨(dú)的控制器和獨(dú)立的USB設(shè)備接口芯片。

　　為增強(qiáng)系統(tǒng)應(yīng)用的靈活性，該方案采用瑞薩單片機(jī)M30627FJPGP，加上USB設(shè)備接口芯片搭建硬件系統(tǒng)，具有低成本、易移植的特點(diǎn)。設(shè)計(jì)中，USB 設(shè)備接口芯片采用CH375，涉及框圖如圖1所示。CH375是一款符合USB 2．0協(xié)議的USB總線(xiàn)通用接口芯片，支持主機(jī)(HOST)方式和設(shè)備(SLAVE)方式，并可以動(dòng)態(tài)地切換主機(jī)和設(shè)備方式。

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　　CH375芯片提供了通用的被動(dòng)并行接口，包括：8位雙向數(shù)據(jù)總線(xiàn)D0～D7、讀選通輸入引腳RD、寫(xiě)選通輸入引腳WR、片選輸入引腳CS、中斷輸出引腳 INT以及地址輸入引腳A0。CH375以總線(xiàn)方式掛接在單片機(jī)數(shù)據(jù)總線(xiàn)上，并且與多個(gè)外圍器件共存。單片機(jī)通過(guò)RD，WR高位地址譯碼產(chǎn)生片選CS和地址線(xiàn)P68(接CH375的A0引腳)的綜合控制，完成與CH375的通信。外擴(kuò)USB電路如圖2所示。

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　　CH375芯片的RD和WR分別連接到單片機(jī)的讀選通輸出引腳和寫(xiě)選通輸出引腳。CS由單片機(jī)的CS4選通。INT輸出的中斷請(qǐng)求是低電平有效，可以連接到單片機(jī)的外部中斷上，單片機(jī)使用中斷方式獲知中斷請(qǐng)求。

　　當(dāng)CS375(即CS)為低電平時(shí)，單片機(jī)可以與CH375進(jìn)行通信操作。此時(shí)，當(dāng)WR為高電平，RD和P68都為低電平時(shí)，CH375中的數(shù)據(jù)通過(guò) D0～D7輸出；當(dāng)RD為高電平且CS和WR及P68都為低電平時(shí)，D7～D0上的數(shù)據(jù)被寫(xiě)入CH375芯片中；當(dāng)RD為高電平且CS和WR都為低電平而 A0為高電平時(shí)，D7～D0上的數(shù)據(jù)被作為命令碼寫(xiě)入CH375芯片中。

　　CH375芯片的UD+和UD-引腳直接連接到USB總線(xiàn)上。CH375芯片內(nèi)置了電源上電復(fù)位電路，并可以產(chǎn)生復(fù)位信號(hào)。為確保上電復(fù)位次序，系統(tǒng)設(shè)計(jì)中，單片機(jī)的復(fù)位信號(hào)是通過(guò)CH375產(chǎn)生的，并將單片機(jī)與CH375共同接到外部復(fù)位電路上。

　　CH375芯片正常工作時(shí)需要外部為其提供12 MHz的時(shí)鐘信號(hào)，在XI和XO引腳之間連接一個(gè)標(biāo)稱(chēng)頻率為12 MHz的晶體，并且分別為XI和XO引腳對(duì)地連接一個(gè)容量為30 pF的高頻振蕩電容。

　　CH375芯片支持5 V電源電壓或者3．3 V電源電壓。該系統(tǒng)使用5 V工作電壓，并且V3引腳處外接容量為O．01 μF的電源退耦電容。

　　2 USB系統(tǒng)的軟件設(shè)計(jì)

　　根據(jù)USB 2．O協(xié)議，在一個(gè)USB系統(tǒng)中，任何一次通信都是由USB主機(jī)發(fā)起的。USB設(shè)備根據(jù)主機(jī)發(fā)來(lái)的命令給予響應(yīng)，執(zhí)行相應(yīng)的操作。在USB系統(tǒng)中，其軟件包括以下幾個(gè)部分：主機(jī)應(yīng)用程序、設(shè)備驅(qū)動(dòng)程序和設(shè)備固件程序。主機(jī)用于程序?yàn)橛脩?hù)提供設(shè)備應(yīng)用的操作平臺(tái)和交互界面，完成數(shù)據(jù)的處理和轉(zhuǎn)換，向設(shè)備發(fā)出控制命令等。設(shè)備驅(qū)動(dòng)程序是USB設(shè)備正常工作的基礎(chǔ)，它提供了設(shè)備接人系統(tǒng)時(shí)要用到的引導(dǎo)文件、設(shè)備信息文件等。

　2．1 動(dòng)態(tài)鏈接庫(kù)

　　系統(tǒng)應(yīng)用中CH375提供了設(shè)備方式下標(biāo)準(zhǔn)驅(qū)動(dòng)CH375WDM．INF和動(dòng)態(tài)鏈接庫(kù) CH375DL L．DLL，通過(guò)加載驅(qū)動(dòng)信息可以在應(yīng)用程序中直接調(diào)用動(dòng)態(tài)鏈接庫(kù)。CH375在計(jì)算機(jī)端提供應(yīng)用層接口。應(yīng)用層接口是由CH375動(dòng)態(tài)鏈接庫(kù)DLL提供的面向功能應(yīng)用的API，所有API在調(diào)用后都有操作狀態(tài)返回，但不一定有應(yīng)答數(shù)據(jù)。CH375動(dòng)態(tài)鏈接庫(kù)提供的API包括：設(shè)備管理API、數(shù)據(jù)傳輸 API、中斷處理API。

　　設(shè)計(jì)中采用C語(yǔ)言作為計(jì)算機(jī)端應(yīng)用軟件的開(kāi)發(fā)平臺(tái)，首先需要將CH375的動(dòng)態(tài)鏈接庫(kù)、驅(qū)動(dòng)程序添加到到編譯環(huán)境中。動(dòng)態(tài)鏈接庫(kù)的使用，簡(jiǎn)化了USB設(shè)備開(kāi)發(fā)的步驟，降低了開(kāi)發(fā)難度，為系統(tǒng)調(diào)試節(jié)省了時(shí)間。

　　2．2 應(yīng)用程序與設(shè)備間的通信

　　通過(guò)動(dòng)態(tài)鏈接庫(kù)的數(shù)據(jù)傳輸函數(shù)，CH375在與M30627FJPGP之間提供了端對(duì)端的連接。應(yīng)用程序與設(shè)備固件間的通信采用請(qǐng)求加應(yīng)答方式，該通信方式具有較好的交互性和可控性。請(qǐng)求加應(yīng)答方式使用一個(gè)下傳的主動(dòng)請(qǐng)求和一個(gè)上傳的被動(dòng)應(yīng)答進(jìn)行交互式的雙向數(shù)據(jù)通信，下傳與上傳一一對(duì)應(yīng)，相互關(guān)聯(lián)。所有的通信都由客戶(hù)應(yīng)用程序發(fā)起，然后以接收到M30627FJPGP的應(yīng)答結(jié)束。

　　2．3 固件程序設(shè)計(jì)

　　CH375與M30627FJPGP之間設(shè)計(jì)成完全的中斷驅(qū)動(dòng)。當(dāng)單片機(jī)處理前臺(tái)任務(wù)時(shí)，USB的傳輸可在后臺(tái)進(jìn)行，這就確保了最佳的傳輸速率和更好的軟件結(jié)構(gòu)，同時(shí)簡(jiǎn)化了編程和調(diào)試。

　　后臺(tái)ISR(中斷服務(wù)程序)和前臺(tái)主程序循環(huán)之間的數(shù)據(jù)交換可以通過(guò)事件標(biāo)志和數(shù)據(jù)緩沖區(qū)來(lái)完成，其實(shí)現(xiàn)原理如圖3所示。

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　　應(yīng)用中的單片機(jī)讀寫(xiě)U盤(pán)軟件可分成兩大部分：應(yīng)用程序和固件程序。應(yīng)用程序完成系統(tǒng)的數(shù)據(jù)采集、處理任務(wù)、外圍控制等功能，固件程序處理底層的USB通信協(xié)議、文件系統(tǒng)，完成數(shù)據(jù)在USB總線(xiàn)上的可靠傳輸和在U盤(pán)上的存取操作。為方便在不同控制器或應(yīng)用系統(tǒng)上進(jìn)行移植，固件采取積木式結(jié)構(gòu)，如圖4所示。

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　　2．4 USB讀寫(xiě)操作

　　USB讀寫(xiě)操作可根據(jù)不同的系統(tǒng)要求設(shè)定執(zhí)行程序。在PCR儀系統(tǒng)設(shè)計(jì)中，M30627FJPGP將通過(guò)-A／D通道采集到的數(shù)據(jù)向U盤(pán)內(nèi)指定的文件： ADC_DATA．TXT追加數(shù)據(jù)。開(kāi)機(jī)后，單片機(jī)向CH375寫(xiě)入配置字，設(shè)定其進(jìn)入主控(Host)模式，進(jìn)人數(shù)據(jù)采集狀態(tài)，等待USB總線(xiàn)事件發(fā)生。U盤(pán)追加數(shù)據(jù)流程如圖5所示。

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　　3 USB在PCR嵌入式系統(tǒng)中的難點(diǎn)及解決方案

　　傳統(tǒng)的USB主控體系結(jié)構(gòu)是PC應(yīng)用的一種理想的解決方案，而在PCR嵌入式系統(tǒng)中很難實(shí)現(xiàn)，具體表現(xiàn)在：

　　(1)嵌入式系統(tǒng)具有的系統(tǒng)資源容量和能力有限；

　　(2)嵌入式應(yīng)用一般要對(duì)實(shí)時(shí)事件做出及時(shí)的響應(yīng)。把USB固件添加到系統(tǒng)中，就會(huì)增加復(fù)雜性，導(dǎo)致在實(shí)時(shí)應(yīng)用的設(shè)計(jì)和調(diào)試中出現(xiàn)更多中斷和實(shí)時(shí)事件；

　　(3)嵌入式市場(chǎng)具有種類(lèi)繁多的處理器和實(shí)時(shí)操作系統(tǒng)。將USB固件開(kāi)發(fā)和移植到任何特定處理器／實(shí)時(shí)操作系統(tǒng)平臺(tái)的努力都將花費(fèi)大量時(shí)間，而且需要工作人員在USB技術(shù)上具有很高的專(zhuān)業(yè)技能。

　　克服嵌入式裝置中USB主控設(shè)計(jì)的復(fù)雜性問(wèn)題，其方法之一是把與USB即插即用能力相關(guān)的智能揉入U(xiǎn)SB主端控制器本身之中。要做到這一點(diǎn)，所采取的辦法是：

　　把USB主控棧和器件驅(qū)動(dòng)的共用組件嵌入到USB控制器硬件中；

　　將USB主控功能壓縮到語(yǔ)族與ANSI C兼容的API中，而這些API被系統(tǒng)用來(lái)獲取USB主控制器中的USB主控功能。

　　這種設(shè)計(jì)方法可以帶來(lái)一個(gè)無(wú)需系統(tǒng)處理器干預(yù)，就能處理USB主控活動(dòng)的USB主控制器。它不僅讓系統(tǒng)資源的消耗降至最低，而且也將通過(guò)系統(tǒng)總線(xiàn)的USB 數(shù)據(jù)流減至最小。API的設(shè)計(jì)將簡(jiǎn)單易行，并且獨(dú)立于處理器和實(shí)時(shí)操作系統(tǒng)，從而有效地降低了API集移植和集成的難度。

　　4 結(jié) 語(yǔ)

　　PCR儀系統(tǒng)的設(shè)計(jì)，實(shí)現(xiàn)USB總線(xiàn)在嵌入式系統(tǒng)中的基本應(yīng)用模式。PCR儀中USB主機(jī)的實(shí)現(xiàn)方法，體現(xiàn)了USB存儲(chǔ)設(shè)備的靈活性和方便性，USB系統(tǒng)嵌入到PCR儀中方便了用戶(hù)的操作，提高了PCR儀的工作效率和儀器的可用性。

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