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動物細胞工程概述

2009-02-17 | rar | 174 | 次下載 | 免費

資料介紹

動物細胞工程概述:本章重點和難點:
了解動物細胞特性及其培養特點,充分認識動物細胞工程在疾病診斷和治療中的應用前
景。
第一節、動物細胞特性
一、動物細胞與植物細胞比較
二、動物細胞在活體內的特性
? 動物細胞在胚胎期即已高度分化,而且這種分化是不可逆轉的,
? 活體內的動物細胞按照分裂能力可以分為三大類:第一類是能保持繼續分裂能力的細
胞;第二類細胞群是永久失去分裂能力的細胞;第三類是靜止細胞群,即所謂的G0細胞。
三、培養條件下動物細胞的生長特性
離體培養的動物細胞可分為兩類:貼壁依賴型(anchorage-dependent)、貼壁非依賴型
(anchorage-independent)和間性貼壁細胞。
四、培養條件下動物細胞的生理特點
1、動物細胞的分裂周期長
各類細胞分裂周期時間表
細 胞 類 別 細胞周期時間(h)
G1 S G2 M 合 計
人胚肺成纖維細胞(WI-38) 8 8.0 4.0 0.8 20.8
人T 細胞 10.5 7.6 3.2 0.8 21.1
小鼠腹水癌細胞 5.7 8.5 3.8 1 19
中國倉鼠卵巢細胞(CHO) 4.7 4.1 2.8 0.8 12.4
急性淋巴性白血病細胞 1~10d 20 2~3d 1.0 2~20d
2、有限細胞系和永久細胞系
? 動物細胞離體培養起始物,我們稱之為原代培養(primary culture)。經繼代培養后即成
為有限細胞系(finite cell line)。
? 大多數細胞系在有限的代數內以不變的形式增殖,當超過有限世代后,它們可能有兩種
情況,一是衰老死亡,二是發育成永久細胞系或稱連續細胞系。
? 有限細胞系轉換成永久細胞系的過度期稱為轉換期(crisis),其轉換過程在動物細胞培養
中稱為體外轉化(in vitro transformation)。
? 永久細胞系有如下特征:細胞形態變化,如細胞變小,黏附性減少,具有較高的核質
比;生長速率增加,倍增時間縮短;對血清的依賴性減?。毁N壁依賴性降低;細胞異倍
體和非整倍體增加,細胞接種到體內后,生癌率上升。
3、動物細胞的環境敏感性
第二節、動物細胞培養的環境與營養要求
一、動物細胞培養的環境要求
1、溫度
2、pH
3、溶氧及氣體環境
4、滲透壓
二、動物細胞的營養需求
1、天然培養基
? 其優點是營養成分豐富、培養效果好;缺點是成分復雜、個體差異大、來源有限。
? 天然培養基的種類主要包括生物性體液(如血清)、組織浸出液(如胚胎浸出液)、凝
固劑(如血漿)、水解乳蛋白等。
2、合成培養基
? 合成培養基是根據天然培養基的成分,用化學物質對細胞體內生存環境中已知物質在體
外人工條件的模擬,經過反復試驗篩選、強化和重新組合后形成的培養基。
? 合成培養基的優點:既能給細胞提供一個近似于體內的生存環境,又便于控制和提供標
準化體外生存環境。
? 合成培養基的主要成分:氨基酸、維生素、糖類、無機離子和其它輔助成分。
§3、動物細胞工程的主要技術及其實踐意義
一、單克隆抗體技術在現代醫學中的應用
單克隆抗體技術的核心是用骨髓瘤細胞(myeloma cell)與經特定抗源免疫刺激的B淋巴細
胞(antigen stimulated B lymphoblast)融合得到雜交瘤細胞(hybridoma cell),雜交瘤細胞既能象
骨髓瘤細胞那樣在體外無限增殖,又具有B淋巴細胞產生特異性抗體的能力。因此,單克隆
抗體技術又稱為雜交瘤技術(hybridoma technology)。
? 單克隆抗體具有高度的特異性與靈敏性,可以廣泛地由于臨床醫學的疾病診斷,以提高
疾病診斷的準確性。
? 利用單克隆抗體技術可以生產各種免疫疫苗,這不僅能大大降低生產成本,同時也增加
了疫苗的安全性。
? 單克隆抗體還有可能用于某些腫瘤的治療,是人類戰勝癌癥十分有望的潛在技術。
? 單克隆抗體技術還可廣泛用于各種基礎醫學研究,從而推動現代醫學的不斷發展。
二、胚胎移植和核移植技術在畜牧業中的應用
? 利用胚胎技術可以以工廠形式大批量生產優質胚胎,從而可以降低胚胎成本,擴大移植
胚的來源,使農畜動物胚胎移植的推廣應用成為可能。
? 體外受精可以準確地確定受精的時間和胚胎發育階段,因此,利用體外受精技術進行核
移植、性別控制和基因導入,可望工廠化生產遺傳性穩定、生產性能優良的家畜,以加
快農畜良種化。
三、動物細胞大量培養生產次生產物
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