反相色譜簡介

　　與HIC一樣，RPC中溶質也通過疏水性相互作用分配于固定相表面，但是，RPC固定相表面完全被非極性基團所覆蓋，表現出強烈的疏水性。因此，必須用極性有機溶劑（如甲醇、乙腈等）或其水溶液進行溶質的洗脫分離。溶質在反相介質上的分配系數取決于溶質的疏水性，一般疏水性越大，分配系數越大。當固定相一定時，可以通過調節流動相的組成調整溶質的分配系數。RPC主要應用于相對分子質量低于5000，特別是1000以下的非極性小分子物質的分析和純化，也可以用于蛋白質等生物大分子的分析和純化。由于反相介質表面為強烈疏水性，并且流動相為低極性的有機溶劑，生物活性大分子在RPC分離過程中容易變性失活，所以，以回收生物活性蛋白質為目的時，應注意選用適宜的反相介質。